南方鲇scp3和dmc1基因的克隆、组织分布及体外相互作用

作者：刘枝华; 董然然^*; 钱佳铭; 张显波

来源：农业生物技术学报, 2021, 29(08): 1574-1583.

• DNA减数分裂重组酶1 (DMC1)
• 联会复合体3 (SCP3)
• 南方鲇
• 基因表达
• 荧光免疫组化
• GST pull-down

联会复合体3 (synaptonemal complex 3, SCP3)和DNA减数分裂重组酶1 (DNA meiotic recombinase 1, DMC1)是减数分裂过程中的关键因子,南方鲇(Silurus meridionalis)中未见相关报道。本研究利用PCR、荧光免疫组化和Western blot技术,对scp3和dmc1进行克隆、亚细胞定位及组织表达分析,通过GST pull-down实验验证体外相互作用。结果显示,南方鲇scp3 (GenBank No. MW075231)和dmc1(GenBank No. MF770581)的CDS为723和1 029 bp,分别编码240和342个氨基酸;同源性分析表明,南方鲇SCP3和DMC1与黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco)的同源性分别高达89.17%和97%;系统进化分析中,南方鲇SCP3和DMC1与其他鱼类聚成一支,然后与四足类聚成一支;反转录PCR (reverse transcriptionPCR, RT-PCR)结果显示,在南方鲇的9个组织中,scp3和dmc1仅在卵巢中表达;qRT-PCR结果显示,scp3和dmc1在55 dah (days after hatching)卵巢中的表达量最高,显著高于30和90 dah的表达量;荧光免疫组化的结果显示,SCP3在南方鲇卵母细胞的细胞核和细胞质中有较强的阳性信号,DMC1在卵母细胞的细胞核中有较强的阳性信号;GST pull-down结果显示,SCP3和DMC1存在体外相互作用。本研究结果为深入探讨南方鲇减数分裂过程中SCP3和DMC1作用机制提供基础资料,为人工繁殖南方鲇获得高质量卵子提供参考依据。

• 单位
  贵州大学; 贵州省农业科学院; 动物科学学院