羊莫氏巴贝斯虫细菌人工染色体(BAC)文库的构建

作者：张浩浩; 陈龙欣; 曹阳; 陈瑛; 关贵全; 马润林

来源：畜牧兽医学报, 2014, 45(08): 1324-1329.

• 巴贝斯虫
• 基因组
• 细菌人工染色体
• 文库

为丰富巴贝斯虫基因组信息,选用感染中国羊的莫氏巴贝斯虫临潭株(Babesia motasi Lintan)为对象,将纯化的红细胞阶段虫体裂殖子包埋于低熔点琼脂糖,用蛋白酶K进行消化处理,得到巴贝斯虫基因组DNA,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分离大片段基因组DNA,将其与CopyControl pCC1BAC Cloning—ready Vector进行连接并转化到EPI300TMEscherichia coli感受态细胞,成功构建了含有34 560个克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株基因组细菌人工染色体(BAC)文库;文库的平均插入片段大小为70 kb,基因组覆盖度为×137,空载率均低于3%,且克隆稳定。该BAC文库的构建,为进一步绘制精细物理图谱、基因组测序、进化及利用比较基因组学筛选致病基因等方面的研究奠定了基础。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 分子发育生物学国家重点实验室; 郑州师范学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国科学院遗传与发育生物学研究所