HPLC法检测人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶的活性

作者：熊晖; 熊磊; 苏丹; 辛华雯; 吴笑春; 李罄; 李高

来源：中国药师, 2007, (08): 738-740.

• 巯嘌呤甲基转移酶
• 活性
• 高效液相色谱
• 荧光检测 Thiopurine methyltransferase
• Activity
• HPLC
• Fluorometric

目的:建立一种测定巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的高效液相色谱法。方法:以S-甲基-14C-腺苷-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为反应底物,TPMT催化6-TG生成6-甲基硫鸟嘌呤(6-MTG),高氯酸沉淀后进样分析。采用Hypersil BDS C18(250mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为磷酸钾缓冲液-乙腈-四氢呋喃(94:4:2),流速1ml·min-1;荧光检测器激发波长:315 nm,发射波长:390 nm。结果:标准曲线方程为Y=0.093 3X-0.002 2,r=0.999 3,线性范围为7.5～300.0 pmol。日内RSD小于5.0%...

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 中国人民解放军广州军区武汉总医院