摘要
目的 探讨C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)基因对肝癌HepG2.215细胞株乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法 用CRP基因过表达载体、CRP基因沉默载体、CRP基因突变载体及CRP基因空载体的慢病毒转染并筛选HepG2.215细胞稳定株进行研究。分为实验组、阴性对照组和空白对照组。采用RT-qPCR检测各组CRPmRNA表达水平,Western blot检测CRP蛋白表达水平,定量PCR检测HBVcccDNA、HBVDNA表达水平,免疫荧光检测乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)表达情况,透射电镜检查观察HepG2.215细胞病毒复制情况,采用ELISA检测培养上清中HBsAg、HBeAg的表达水平,采用RT-qPCR检测HBVmRNA、HBVpgRNA的表达。结果 CRP在HepG2.215细胞中的表达高于HepG2细胞(P<0.05)。CRP基因过表达组与阴性对照组相比较,HepG2.215细胞CRP蛋白和CRPmRNA、HBVcccDNA、HBVpgRNA及HBcAg表达升高,沉默CRP基因上述各项指标表达水平下降(P均<0.05);CRP基因过表达组与空白对照组相比较,HepG2.215细胞HBVmRNA、HBVDNA、HBsAg、HBeAg表达水平升高;CRP基因沉默组与空白对照组相比较,上述各项指标表达均降低(P均<0.05);CRP基因突变表达组与空白对照组相比较,HepG2.215细胞HBsAg表达水平升高(P<0.05)。结论 CRP可促进肝癌HepG2.215细胞HBV的复制,并促进HBV相关抗原HBsAg、HBeAg、HBcAg的表达。CRP突变对HBsAg表达有一定促进作用。
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单位宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学