硫酸软骨素促进成肌细胞增殖作用的研究

作者:王琳; 周立冬; 吴美; 刘理金; 向勇平; 刘谋元; 刘爱兵
来源:中国修复重建外科杂志, 2016, 30(10): 1290-1294.

摘要

目的探讨硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)对成肌细胞增殖以及肌管形成的影响。方法取第5代成肌细胞制成浓度为1×108个/L的细胞悬液,依据在成肌细胞培养基中添加不同浓度CS,将实验分为A组(0μg/m L)、B组(50μg/m L)、C组(100μg/m L)和D组(200μg/m L)。干预4、5、8 d于倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化及肌管形成情况,6 d采用MTT法检测各组细胞增殖情况,8 d行HE染色检测各组细胞肌管形成数。结果倒置显微镜观察示,细胞贴壁后呈单核梭形,细胞核呈卵圆形,细胞质致密;贴壁90%时整体肌母细胞呈漩涡状走行,长梭状生长。继续培养成肌细胞细胞核出现融合现象,形成多核肌管。8 d,A组细胞多数已融合形成肌管,B、C组细胞有部分未融合,D组细胞融合形成肌管数最少。MTT检测示,A、B、C、D组活细胞吸光度(A)值分别为0.045 2±0.004 4、0.540 4±0.096 7、0.660 9±0.143 4、1.069 0±0.039 0,A组显著小于B、C、D组,B、C组小于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色示,A组细胞大多数已融合形成肌管;B、C组有少部分细胞未融合形成肌管;D组细胞融合形成肌管数相对最少,未融合细胞数稍多。A、B、C、D组肌管形成数分别为(222.01±30.02)、(193.13±42.46)、(170.26±11.96)、(136.88±16.78)根,各组间比较差异无统计学意义(F=1.658,P=0.252)。结论 CS显著促进成肌细胞增殖,200μg/m L CS促成肌细胞增殖能力显著优于其他浓度。