细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶抑制剂4a信号通路对人骨骼肌成肌细胞衰老的诱导及对线粒体膜电位的调控

作者：唐硕; 高翃; 闫栋; 杨娟; 李卓伦; 胡鹏涛; 熊东林; 廖翔^*

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(06): 924-926.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.06.007

• 衰老
• 人骨骼肌成肌细胞
• 细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶抑制剂4a
• 线粒体膜电位

目的观察细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶抑制剂4a(INK4a)信号通路对线粒体功能的影响。方法重组慢病毒载体pLVX-p16INK4a被构建出并感染第3代人骨骼肌成肌细胞, 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法与Western blot鉴定p16INK4a基因转录与蛋白表达, 7 d后, 用衰老相关β-半乳糖苷酶染色鉴定细胞衰老程度。同时, 用JC-1染料染色和流式细胞仪分别检测线粒体膜电位水平。结果成功转染了p16INK4a的成肌细胞出现明显衰老表型, 其细胞线粒体膜电位为(-40.287±12.663) mV, 较阳性对照(CV)及阴性对照(NC)组的(-9.267±1.332) mV和(-6.967±2.031) mV明显下降(P=0.000), 而p16INK4a蛋白和mRNA相对表达量分别为45.25±8.21和33.89±7.87, 明显高于CV组的10.18±2.69和5.26±1.92及NC组的9.41±1.70和7.16±1.86(P=0.000)。结论 INK4a信号通路的上调导致了人骨骼肌成肌细胞的衰老, INK4a通路是人骨骼肌成肌细胞衰老的直接诱因;另外, INK4a通路能对线粒体通路产生作用, 使线粒体膜电位下降, 激发线粒体通路, 间接加速成肌细胞的衰老。

• 单位
  深圳市南山区人民医院