E1A激活基因阻遏子(CREG)对过氧化氢诱导骨髓间充质干细胞凋亡保护作用的实验研究

作者：张天资^*; 王昕; 张妍; 华婷; 张秋丽

来源：中国实用眼科杂志, 2016, 34(01): 87-91.

• 骨髓间充质干细胞
• E1A激活基因阻遏子
• 过氧化氢H2O2
• 细胞凋亡

目的探讨EIA激活基因阻遏子(CREG)过表达修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)能否有效对抗炎症因子过氧化氢(H2O2)诱导的BMSCs细胞凋亡,为其在视网膜变性类疾病的治疗提供理论基础。方法实验研究。对2012年1月至2014年12月在内蒙古民族大学附属医院眼科实验研究,以原代培养的大鼠BMSCs为实验细胞模型,以携带有CREG基因的腺病毒载体感染BMSCs,制备CREG基因修饰的BMSCs,Western blot及荧光显微镜鉴定CREG基因在BMSCs中的表达效率。TUNEL法检测添加500 μmol/L过氧化氢(H2O2)刺激24 h后,检测controlBMSCs组、normBMSCs组、GFPBMSCs组、CREGBMSCs组的BMSCs凋亡率。Western blot方法检测caspase-3及BCL-2表达量。结果 (1)瞬时转染Ad-GFP的BMSCs中GFP(绿色荧光蛋白)表达量达到90%,所构建的载体成功将目的基因CREG转染BMSCs。(2)通过TUNEL法和Western blot检测研究发现,Ad-CREG瞬时转染的BMSCs可以有效抑制500 μmol/L H2O2刺激24 h后诱导的凋亡,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论体外诱导BMSCs过表达CREG能有效抑制炎性因子H2O2诱导的BMSCs凋亡,对提高移植后BMSC存活率及今后应用于治疗视网膜变性类疾病可能发挥一定作用。

• 单位
  吉林大学第二医院; 内蒙古民族大学附属医院