摘要
牡丹花期短暂,严重影响了其观赏价值和产业的发展,故延长牡丹的观赏期成为亟需解决的问题。本研究以已获得的牡丹花衰老相关差异蛋白PsSAMS的基因序列为基础,分别利用生物学软件和qRT-PCR技术对其进行了生物信息学和表达模式分析,构建了重组质粒pMAL-c5X-PsSAMS并将其转化到大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达及纯化。结果显示,PsSAMS基因的编码序列全长为1 164 bp,编码387个氨基酸,分子量为42.56 kD,等电点为6.278,为亲水性稳定蛋白,含有34个可能的磷酸化位点,二级结构以无规卷曲和α-螺旋较多。qRT-PCR结果显示,PsSAMS在花蕾期的表达量显著高于盛花期和衰败期,且在花瓣中的表达量最高。构建的重组质粒pMAL-c5X-PsSAMS在BL21中表达并经柱Poly-Prep?层析柱纯化获得较为纯净的PsSAMS蛋白。本研究结果不仅可为进一步研究PsSAMS基因在牡丹花衰老调控过程中的功能提供理论基础,还可为培育花期较长的牡丹品种提供候选基因。
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单位青岛农业大学; 生命科学学院