摘要
通过毛细管电泳检测技术,应用到检测纳米抗体亲和力上,找到新的检测纳米抗体亲和力测定的方法。利用毛细管电泳在分析检测上分离速度快、实验时间短、样品和溶剂用量少的优势,在最佳浓度、pH、电压条件下来测定纳米抗体和抗原的结合常数。通过实验不断优化毛细管电泳浓度、pH和电压的条件,使毛细管电泳测定纳米抗体达到最佳测试状态,通过最优化条件实验表明,在电泳浓度为50 mM、pH=7和电压为20 kV的条件时为最佳测试实验条件,通过不同浓度抗体和定值抗原的结合,绘制标准曲线并计算出测定常数,求得纳米抗体抗原的结合常数,并用现在常用的Biacore检测方法对实验结果进行验证。结果表明,优化条件后毛细管电泳在测定纳米抗体亲和力方面与Biacore测定结果相近,为以后纳米抗体亲和力测定提供一种新方法。
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单位中国科学院青岛生物能源与过程研究所; 深圳市国创纳米抗体技术有限公司; 生命科学技术学院; 长春理工大学