摘要
背景与目的:在利用磷酸化蛋白质富集结合蛋白质组学技术分析EB病毒潜伏膜蛋白1(latent membrane protein1,LMP1)调节的磷酸化蛋白质分子时,我们发现了包括AnnexinⅠ在内的25个新的受EB病毒LMP1调节的磷酸化蛋白质分子。本实验探讨LMP1调节AnnexinⅠ磷酸化的信号通路。方法:采用鼻咽癌细胞系CNE1和LMP1稳定表达的细胞系CNE1-LMP1,Western blot检测AnnexinⅠ的蛋白表达水平;免疫沉淀结合Western blot检测AnnexinⅠ的丝氨酸和酪氨酸磷酸化;激酶分析实验检测蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的活性。结果:LMP1对AnnexinⅠ的蛋白表达水平没有影响,LMP1上调AnnexinⅠ的丝氨酸磷酸化水平,而对酪氨酸磷酸化水平没有影响。在CNE1细胞中PKC的相对活性为0.97±0.05,CNE1-LMP1细胞中的PKC相对活性为1.22±0.10,CNE1与CNE1-LMP1细胞之间PKC的活性差异有统计学意义(P<0.01,n=6),表明LMP1可以上调PKC活性。AnnexinⅠ的丝氨酸磷酸化水平随PKC活性的变化而变化。结论:EB病毒LMP1通过PKC信号通路调节AnnexinⅠ丝氨酸磷酸化。
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单位暨南大学; 中南大学湘雅医学院