摘要
目的:研究黄芪甲苷对D-半乳糖(D-gal)诱导原代培养心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法:分离和培养Wistar乳鼠原代心肌细胞,将细胞分为正常对照组(无血清DMEM高糖培养基)、D-gal组(含5 g/L D-gal的无血清DMEM高糖培养基)和黄芪甲苷低、中、高质量浓度组(分别先以含25、50、100μg/m L黄芪甲苷的无血清DMEM高糖培养基培养1 h,然后换为含有相应质量浓度黄芪甲苷和5 g/L D-gal的无血清DMEM高糖培养基)。采用CCK-8法检测培养48 h后细胞活性,分别采用Hoechst染色法(培养24 h)和流式细胞术(培养48 h)考察细胞凋亡情况,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测培养24 h后细胞中凋亡相关因子(Bcl-2、Bax、Caspase-3)和心房钠尿肽(ANP)m RNA表达水平。结果:与正常对照组比较,D-gal组细胞的活性以及细胞中Bcl-2 m RNA水平、Bcl-2/Bax比值降低,细胞凋亡率和细胞中Bax、Caspase-3、ANP m RNA水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与D-gal组比较,黄芪甲苷各浓度组细胞的活性以及细胞中Bcl-2 m RNA水平、Bcl-2/Bax比值均升高,细胞凋亡率和细胞中Bax、Caspase-3、ANP m RNA水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且具有一定浓度依赖性。结论:黄芪甲苷对D-gal诱导的原代心肌细胞凋亡具有一定的保护作用,其机制可能与升高细胞中Bcl-2/Bax比值和下调细胞中Caspase-3、ANP m RNA的表达有关。
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单位内蒙古自治区人民医院; 内蒙古医科大学附属医院; 内蒙古医科大学