CYP17A1基因敲低对山羊睾丸间质细胞睾酮合成和睾丸发育相关基因表达的影响

作者：张远; 陈祥^*; 张艳; 付开斌; 唐文; 陈家靖; 嵇桃桃; 杨沛方

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(12): 2535-2544.

• 细胞色素P450c17(CYP17A1)
• 黔北麻羊
• 睾丸间质细胞
• 细胞增殖
• 睾丸发育

细胞色素P450c17(cytochrome P450c17, CYP17A1)是胆固醇合成雄激素途径中的限速酶，在雄激素生物合成中具有关键作用。明确CYP17A1对山羊(Capra hircus)睾酮合成和睾丸发育的影响，对于提高公羊繁殖力具有重要意义。本研究以黔北麻羊为研究对象，构建CYP17A1的RNA干扰载体并转染至睾丸间质细胞，以qRT-PCR和Western blot技术检测CYP17A1基因敲低效果，以CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测CYP17A1敲低对睾丸间质细胞增殖的影响；利用qRT-PCR检测增殖相关基因、睾酮合成相关基因以及睾丸发育相关基因的表达水平。结果显示，CYP17A1在各月龄的睾丸和附睾组织中均有表达，其基因敲低效果明显，CYP17A1基因和蛋白表达均极显著下调(P<0.01)，睾丸间质细胞的增殖受到极显著抑制(P<0.01);CYP17A1基因敲低使间质细胞增殖相关基因增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白E(cyclin E)，睾酮合成相关基因CYP11A1、3β-羟基类固醇脱氢酶1型(3β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1, HSD3B1)、HSD17B3和CYP19A1以及睾丸发育相关基因—类无精症缺失基因(deleted in azoospermia like, DAZL)和胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor 2, IGF2)均发生显著的下调表达(P<0.01)。本研究为深入探讨CYP17A1基因对黔北麻羊繁殖性状的影响提供基础资料。

• 单位
  动物科学学院; 贵州大学