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摘要
背景:补肾类方剂对骨髓间充质干细胞的促增殖作用已经被证实,但其作用机制尚不明确,该研究以归肾丸为例,探讨其可能的作用机制。目的:通过观察归肾丸水提物对骨髓间充质干细胞增殖的影响,探究归肾丸滋补肾精与骨髓间充质干细胞增殖之间的关系。方法:从3周龄雄性SD大鼠股骨骨髓中分离提取骨髓间充质干细胞,采用全骨髓贴壁法将其纯化,选用纯度较高的第3代细胞进行药物干预,将其分为空白对照组和10,20,40,80,100 mg/L归肾丸水提物组,在体外连续培养5 d以观察量效关系和时效关系。倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法评估细胞增殖活性,Western blot检测细胞中PI3K、AKT蛋白表达。结果与结论:①归肾丸水提物组的细胞增殖能力明显高于空白对照组,存在一定的量效和时效关系,尤以80 mg/L归肾丸水提物干预3 d时作用效果最佳;②归肾丸水提物组骨髓间充质干细胞中PI3K、AKT蛋白的表达明显高于空白对照组;③结果提示,归肾丸水提物能有效促进骨髓间充质干细胞的增殖,可能与其参与调控PI3K/AKT信号通路有关。
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单位广州中医药大学; 广州中医药大学第三附属医院
