响应面法优化VitroGel 体系上人源肝细胞三维培养条件的研究

作者：王晶波; 陈晨; 马妍; 杨倬; 秦文; 王丽媛; 沈葹; 宫照龙; 卓勤^*

来源：卫生研究, 2023, 52(04): 579-610.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.04.010

• 响应面法
• 三维培养
• 水凝胶
• 人源肝细胞

目的 通过响应面法优化基于VitroGel体系的人源肝细胞(L02细胞)三维培养条件，构建体外肝细胞模型。方法 L02细胞采用VitroGel系统进行三维培养。通过单因素实验确定3个关键因素(接种细胞浓度、培养时间和水凝胶稀释度)的适宜水平，再通过响应面法分析确定基于VitroGel系统的人源肝细胞三维培养的最佳条件。使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞活力。通过荧光染色测试测量L02细胞的增殖性能和死活情况。结果 基于VitroGel系统的人肝细胞最佳培养条件为接种细胞浓度为1.1×105/mL,培养时间为9.5 d,水凝胶稀释度为1∶3.7。在此条件下，细胞活性的OD值为2.13,与理论值2.17的相对误差仅为1.84%,表明该条件合适可靠。荧光染色和死活细胞检测证明三维肝细胞模型构建成功。结论 采用响应面法确定了基于VitroGel体系的人源肝细胞三维培养的最佳条件，成功构建了具有高细胞活性的肝细胞模型。

• 单位
  中国疾病预防控制中心营养与健康所