三叉神经节递质的UHPLC-MS/MS法测定

作者：付晓芸; 唐雪; 李星影; 毕禄莎; 孙嘉茵; 徐小平^*

来源：中国测试, 2019, 45(01): 64-69.

• 氨基酸类神经递质
• 三叉神经
• 超高效液相色谱
• 三重四极杆质谱

该文采用UHPLC-MS/MS建立一种同时测定大鼠三叉神经节中4种神经递质的方法。SD大鼠三叉神经节组织匀浆后,加乙腈沉淀蛋白,制备成供试品溶液;以Discovery HS F5-3(2.1 mm×150 mm,3.0μm)为色谱柱,0.1%甲酸溶液(A相)和0.1%甲酸-40%乙腈溶液(B相)为流动相,梯度洗脱进行分离;然后在+ESI和MRM模式下检测,以Glycine-N15为内标。结果表明:4种氨基酸的线性关系良好(r2≥0.999),检测限和定量限分别为0.14～1.23ng/mL和0.47～4.11ng/mL;在浓度范围内,进样精密度、日内和日间精密度良好, RSD分别在0.90%～5.17%,3.01%～7.19%,4.64%～14.49%;加样回收率为94.8%～108%。大鼠三叉神经节炎症模型在0,1,3,5,7 d4种神经递质的含量均发生不同程度的变化,其中天门冬氨酸(Asp)在炎症期没有明显的变化(P>0.05),而其余3种递质变化显著(P<0.05),且谷氨酸(Glu)最明显,体外实验也证实Glu在炎症条件下含量增加。所建方法可高效同时分离检测三叉神经中4种氨基酸的含量,有较好的使用价值。

• 单位
  四川大学