铜绿假单胞菌整合子可变区长度对intⅠ1基因表达的影响

作者：冯银; 陈体; Govinda Paudel; 袁金玲; 黄利华; 伍勇

来源：中华医院感染学杂志, 2013, 23(08): 1745-1748.

• 铜绿假单胞菌
• 整合子
• 整合酶
• 基因盒
• 耐药
• 实时荧光定量PCR

目的分析铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子可变区的长度对Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1)表达水平的影响,以探讨整合酶表达的调控机制。方法将25株临床分离的Ⅰ类整合子阳性铜绿假单胞菌按可变区的长度分为A、B组(A组:1000～2000bp;B组:>2000bp),提取细菌的总RNA并逆转录为cDNA,用实时荧光定量PCR法测定两组细菌intⅠ1mRNA的相对表达量,并比较具有不同长度可变区的细菌中intⅠ1基因的平均表达水平。结果两组细菌中intⅠ1mRNA的相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);A组细菌intⅠ1和16SrRNA的Ct值均值及⊿Ct值分别为:17.25、10.34、6.91,B组细菌intⅠ1和16SrRNA的Ct值均值及⊿Ct值分别为:18.91、9.47、9.45,⊿⊿Ct为5.81;A组细菌的intⅠ1mRNA平均表达水平是B组的5.81倍。结论在临床分离的Ⅰ类整合子阳性的铜绿假单胞菌中,短可变区组整合酶表达水平较高,而长可变区组整合酶表达水平较低,提示Ⅰ类整合子中整合酶的表达水平可能受整合子可变区基因盒数目的影响,从而影响整合子继续捕获基因盒的能力。

• 单位
  中南大学湘雅三医院; 中心实验室