血必净通过高迁移率族蛋白1对热应激神经干细胞的保护作用研究

作者：李红波; 温敏勇; 罗苑苑; 郑述铭; 张先进; 李春河; 曹蕊; 王林

来源：广州中医药大学学报, 2022, 39(01): 165-170.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2022.01.028

• 血必净
• 热射病
• 热应激
• 脑保护
• 高迁移率族蛋白1
• 自噬
• 凋亡
• 神经干细胞

【目的】探讨血必净通过高迁移率族蛋白1(HMGB1)对热应激神经干细胞的保护作用机制。【方法】以43℃热刺激60 min建立热应激大鼠脑神经干细胞模型。实验分为7组,即阴性对照组、热应激组、非热应激+血必净(浓度25%)组、热应激+血必净低剂量(浓度5%)组,热应激+血必净中剂量(浓度15%)组、热应激+血必净高剂量(浓度25%)组、热应激+HMGB1抑制剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力;采用Ac-DEVD-pNA底物法检测细胞Caspase-3活性;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白轻链3(LC3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及凋亡相关蛋白、Caspase-3表达水平;使用核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提取细胞胞核、胞浆蛋白,Western Blot检测胞内及胞浆内HMGB1表达水平。【结果】选择热应激复温9 h时间点与血必净高剂量用于后续实验。与阴性对照组比较,热应激组细胞p62、LC3-up表达量降低,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1(胞浆)表达量增高(P0.05)。【结论】血必净可通过促进HMGB1胞浆转位诱导自噬抑制热应激脑神经干细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。

• 单位
  广州中医药大学第一附属医院