一种海洋几丁质酶产生菌的筛选及酶学性质研究

作者：严佳佳; 尤田; 张雪梅; 李欣格; 薛鲜丽; 王德培^*

来源：食品与发酵工业, 2023, 49(13): 40-48.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.033466

• 菌株筛选
• 副溶血性弧菌
• 几丁质
• 几丁质酶
• 酶学性质

海洋是自然界几丁质主要来源地，滋养出种类繁多可降解几丁质的微生物，因此从海洋中筛选产高活性几丁质酶的细菌，是获得高产几丁质酶微生物的有效途径。该文以胶体几丁质为唯一碳源，从渤海滩涂筛选到一株具有降解几丁质特性的细菌Y-8,对其进行鉴定并研究其几丁质酶酶学性质。Y-8菌株经分子鉴定为副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus),发酵上清液经SDS-PAGE及蛋白质谱分析，发现其存在2种几丁质酶，分别为Chi1几丁质外切酶，氨基酸残基数为848,理论分子质量为87.6 kDa; Chi2几丁质内切酶，氨基酸残基数为1 054,理论分子质量为112.9 kDa。Y-8所产生的几丁质酶能够高效降解胶体几丁质，获得单一产物N-乙酰氨基葡萄糖，其最适反应温度为55℃,45℃保温1 h,仍能保持70%以上活性；最适pH为6.0,在pH 4.0～9.0、37℃保温1 h后相对酶活性保留55%以上，具有较好的稳定性。10 mmol/L的Mn2+能使几丁质酶活性提高362%,而EDTA以及SDS、吐温-20、吐温-80对酶活力具有抑制作用。

• 单位
  生物工程学院; 天津科技大学