摘要

5’-核苷酸及其衍生物因具有较高营养保健价值和药用价值,市场需求不断增大。核酸酶P1是目前5’-核苷酸工业生产的关键酶,但游离酶存在难以重复利用、消耗量过大等局限性。为了解决上述问题、提高核酸酶的利用效率,本研究利用不同类型树脂对核酸酶P1进行固定化。以核酸酶P1的吸附量和固定化酶的酶活为评价标准,阴离子交换树脂1(AER1)固定化时其效果最佳,优化后的最佳的固定化条件为酶量3 644.7 U/mL(2.2 mL)、戊二醛浓度0.25%、交联时间1.5 h、固定化时间10.0 h、pH 5.1。该条件下制备的核酸酶P1的比酶活为47980.95 U/g。在此基础上,评价了最佳条件下制备的固定化酶的稳定性。结果表明,固定化酶的热稳定性有一定程度的提高;固定化酶的酸碱稳定性大幅度提高;固定化酶在4℃下保存6周后,酶活保留51.8%,是游离酶的1.6倍。