siRNA对骨肉瘤U2OS细胞株MDM2-mRNA表达的抑制作用

作者：吕佳音; 吴丹凯; 张舵舵; 秦中国; 吴丹华; 赵燕颖

来源：中国实验诊断学, 2007, (07): 878-881.

• RNA干扰
• U2OS
• MDM2

目的研究载体介导的siRNA(small interfere RNA)技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建重组体(PGCsilencerTM-MDM2 siRNA)。实验分转染重组质粒组,转染阴性对照质粒组和只加脂质体的空白组;RT-PCR法观察U2OS细胞中MDM2-mRNA表达改变。结果成功构建发卡样MDM2siRNA真核表达载体(PGCsilencer TM-MDM2 siRNA);PGCsilencer TM-MDM2 siRNA转染到U2OS细胞后,MDM2-mRNA表达较空白组显著下降(P<0.05),转染阴性对照质粒组与空白组无显著差异(P>0.05)。结论成功构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA重组体,并能有效抑制U2OS细胞中MDM2-mRNA表达。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院