心肌线粒体双向凝胶电泳技术分析

作者：弭守玲; 葛均波; 孙爱军; **强; 邹云增; 李纪明

来源：中国临床医学, 2006, (05): 700-702.

DOI：10.3969/j.issn.1008-6358.2006.05.003

• 心脏
• 线粒体
• 蛋白质组
• 双向凝胶电泳
• 质谱

目的:建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术。方法:分离200 g雄性SD大鼠心肌线粗体,抽提心肌线粒体的全蛋白,以固相pH梯度、等电聚焦为第一向和垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向行双向凝胶电泳,对样品制备、上样量、电泳参数、不同固定方式等相关技术进行优化。凝胶行硝酸银染色．扫描仪获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析。结果:45％乙醇和5％乙酸的固定液对蛋白质固定效果曩好;构建了心肌线粒体高分辨率和重复性的双向凝胶电泳图谱。结论:建立了SD大鼠心肌线粒体蛋白质组的双向凝胶电泳分析技术。

• 单位
  复旦大学附属中山医院; 复旦大学; 上海市心血管病研究所