miR-107靶向细胞周期蛋白E1对人非小细胞肺癌A549细胞功能的影响研究

作者：刘荷英; 王辉; 季洪健; 姚秋菊

来源：重庆医学, 2018, 47(08): 1025-1032.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8348.2018.08.006

• 微小RNA-107
• 细胞周期蛋白E1
• 细胞周期
• 癌,非小细胞肺

目的探讨miR-107对非小细胞肺癌A549细胞功能的影响及可能的靶基因。方法实验分为脂质体+miR-107模拟物过表达组(OV-miR-107组)、脂质体+miR-107抑制模拟物下调组(KD-miR-107组)和脂质体+阴性对照模拟物组(NC组),siRNA的细胞转染分别为siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3。MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞实验检测细胞周期,双荧光素酶报告基因实验检测miR-107下游靶基因,实时定量逆转录PCR和Western blot分别检测下游靶基因mRNA和蛋白表达。结果miR-107呈时间和剂量依赖性地抑制A549细胞的增殖(P<0.05);miR-107阻滞更多A549细胞停留在G0G1期,而S期和G2M期占比下降(P<0.05);miR-107结合于细胞周期蛋白E1(CCNE1)的3′-UTR区域246253bp位点,并降低CCNE1mRNA和蛋白表达(P<0.05);A549细胞中下调CCNE1后,siRNA-2抑制细胞增殖(P<0.05)并阻滞细胞停留在G0G1期(P<0.05)。结论 miR-107靶向调节CCNE1抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖和调控细胞周期。