大黄鱼(Larimichthys crocea)Tristetraprolin基因的克隆与功能分析

作者：汪慧娟; 何志巧; **; 周素明; 张晓林; 申望^*

来源：海洋与湖沼, 2023, 54(06): 1786-1796.

• 大黄鱼
• RNA结合蛋白
• Tristetraprolin蛋白
• 炎症反应
• 转录后调控

Tristetraprolin (TTP)是广泛存在于真核生物的RNA结合蛋白。TTP通过促进mRNA降解或抑制翻译在转录后水平抑制炎症因子表达,是炎症性疾病的潜在治疗靶点。采用RACE技术获取了大黄鱼(Larimichthys crocea) TTP (命名为LcTTP) cDNA的全长序列。LcTTP全长cDNA 1 508 bp,包括77 bp的5′-非编码区(5’-UTR)、183 bp的3’-UTR和1 248 bp的开放阅读框(ORF),编码418个氨基酸残基。推导的LcTTP理论分子量44 897.78 Da,预测等电点pI 8.37;哺乳动物TTP的重要功能结构域:N-端核输出序列(NES)、中央串联锌指结构域(TZF)、C-端NOT1-结合结构域(NOT1-BD)也在LcTTP中保守存在;系统发育分析显示LcTTP和其他脊椎动物TTP聚为一支,并与哺乳动物ZFP36家族其他成员ZFP36L1、ZFP36L2和ZFP36L3的进化支分离。组织表达特异性分析显示检测的9个组织均表达LcTTP mRNA,但不同组织间表达水平差异大,其中肌肉组织表达水平最高。大黄鱼头肾细胞系LYC-hK细胞中过表达LcTTP上调LPS诱导早期(1 h) TNF-α mRNA表达量,之后TNF-α mRNA表达量快速下调至接近对照组水平(1.5 h);放线菌D抑制转录后过表达LcTTP上调TNF-α mRNA降解速率,表明LcTTP可通过促进TNF-α mRNA降解调节TNF-α表达。以上研究结果提示LcTTP可能是大黄鱼炎症反应平衡关键调控蛋白,在大黄鱼感染性病害防治策略开发中有潜在应用价值。

• 单位
  宁波大学; 浙江海洋大学