可视化跨越式滚环扩增技术检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

作者：苑宁; 张蕴哲; 张海娟; 于泽; 卢鑫; 张伟^*

来源：食品科学, 2021, 42(16): 239-245.

• 跨越式滚环等温扩增技术
• 单核细胞增生李斯特氏菌
• hlyA基因
• 检测
• 可视化

建立一种新型的单核细胞增生李斯特氏菌检测方法,即通过可视化跨越式滚环等温扩增(saltatory rolling circleamplification,SRCA)技术检测单核细胞增生李斯特氏菌。根据单核细胞增生李斯特氏菌hlyA基因序列设计引物,进行特异性验证,对灵敏度和人工污染样品的检出限进行测定。通过检测70种实际食品样品对SRCA方法的敏感性、特异性和符合率进行评价。结果表明:所有单核细胞增生李斯特氏菌呈阳性结果,非单核细胞增生李斯特氏菌呈阴性结果,说明该方法特异性良好。SRCA方法的灵敏度为8.9×100 fg/μL,是传统聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法的1 000 倍,检出限为2.8×100 CFU/g,是传统PCR方法的1/1 000。在实际样品的检测中,SRCA方法与GB 4789.30—2016《食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌》方法进行比较,其敏感性、特异性和符合率分别为100%、97.01%和97.14%。可视化SRCA技术具有操作简便、设备简单、特异性强、灵敏度高、检出限低、检测成本低等优点,适合在基层单位和中小型食品企业中推广应用。

• 单位
  河北农业大学; 生命科学学院