摘要
目的 了解青海省青南地区rpsL基因点突变引起鼠疫菌耐链霉素的现状,为今后青南地区突发人间鼠疫的精准临床用药及预防耐药发生提供理论依据。方法 筛选1957—2009年青海省青南地区取自鼠疫患者、媒介昆虫体内及中间宿主的104株代表性鼠疫菌,用赫氏平皿进行分离培养,采用十二烷基磺酸钠裂解和苯酚-氯仿法提取代表性鼠疫菌的DNA,针对我国链霉素耐药基因rpsL基因设计引物及TaqMan-MGB探针Probe1[FAM]和Probe2[VIC],利用TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光PCR技术,对青南地区104株鼠疫菌链霉素耐药位点rpsL基因的突变情况进行检测。结果 青南地区104株被试菌株FAM检测结果均为阳性,对应检测rpsL(128:A),RFU峰值>1 000,阴性<200。所有被试菌株VIC检测结果均为阴性,对应检测rpsL(128:G),RFU峰值<200,阳性>1 000。即青南地区104株鼠疫菌中未发现耐链霉素rpsL基因点突变菌株。结论 了解到青南地区鼠疫菌耐链霉素菌株分布情况,为青南地区预防耐药发生以及鼠疫菌临床治疗提供了基础数据。
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