石蒜碱对骨肉瘤的抑制作用及机制探讨

作者：袁晓慧; 张平; 喻婷婷; 谭涛; 杨升东; 黄华坤; 张露露; 杨春梅; 罗小辑; 罗进勇

来源：肿瘤, 2019, 39(09): 691-700.

• 骨肉瘤
• 石蒜碱
• 细胞增殖
• 细胞迁移分析
• Wnt/β-catenin信号通路

目的 :分析石蒜碱对人骨肉瘤143B细胞的抑制作用及其潜在分子机制。方法 :分别用0～8μmol/L的石蒜碱处理人骨肉瘤143B细胞,然后采用结晶紫法、MTT法和克隆形成实验检测石蒜碱对143B细胞增殖的影响,细胞划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞迁移和侵袭相关标志基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和MMP-9,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase 3和剪切型Caspase 3(cleaved Caspase 3,c-Caspase 3)的表达情况。然后,采用荧光素酶报告基因系统检测细胞中T细胞因子(T-cell factor,TCF)/淋巴样增强因子(lymphoid enhancer factor,LEF)的转录活性,再用蛋白质印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin及下游靶分子Cyclin D1和c-Myc的表达。结果 :石蒜碱明显抑制骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移和侵袭,同时促进细胞凋亡(P值均<0.01)。石蒜碱处理后,143B细胞中迁移和侵袭相关蛋白MMP-7和MMP-9的表达量明显下调(P值均<0.05);凋亡相关蛋白Bcl-2表达量下调(P <0.01),而Caspase3和c-Caspase3的表达量明显上调(P值均<0.05);同时,TCF/LEF转录活性明显下降(P <0.01),Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、c-Myc和CyclinD1蛋白水平均明显降低(P值均<0.05)。结论 :石蒜碱可能通过阻断Wnt/β-catenin信号通路来抑制人骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院