番茄黄化曲叶病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立

作者：乔宁; 李美芹; 吕金浮; 刘永光; 王兴翠; 竺晓平

来源：核农学报, 2013, (04): 473-478.

• 番茄黄化曲叶病毒
• DAS-ELISA
• 快速检测 Tomato yellow leaf curl virus
• DAS-ELISA
• Rapid detection

以纯化的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)外壳蛋白为抗原,免疫家兔制备并纯化出TYLCV的多克隆抗体IgG,以此抗体做包被抗体,并用碱性磷酸酶(AP)对其进行标记作为酶标抗体,从而建立了番茄黄化曲叶病毒的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。通过ELISA方阵试验确定该法的最佳工作浓度为酶标抗体(IgG-AP)作1∶400倍稀释,包被抗体浓度为6.25μg.mL-1;并且确定了抗原最低检出浓度为9.75ng.mL-1。采用该法对山东寿光的田间病样进行了定性和定量检测,结果表明建立的DAS-ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于番茄黄化曲叶病毒的常规检测。

• 单位
  山东农业大学; 潍坊科技学院