转基因水稻标准质粒分子的构建与分析

作者:刘晋; 邓汉超; 王学林; 侯红利; 李永红; 杨启鹏; 陈惠芳; 周向阳
来源:中国种业, 2016, (12): 52-55.
DOI:10.19462/j.cnki.1671-895x.2016.12.017

摘要

针对目前转基因(GM)产品检测标准分子的缺乏,构建适用于转基因水稻的标准质粒分子pMDSPS和pMDTheli,其中包含水稻内源基因SPS通用序列,耐盐基因ThST3和Ubiquitin启动子序列的构建特异性Theli序列。对其特异性及制备标准曲线的可靠性进行鉴定研究,研究结果显示,在进行普通PCR扩增时,采用质粒标准分子为阳性对照,均能特异扩增目的条带。以标准质粒分子构建的标准曲线,SPS基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9993,PCR扩增效率在1.00041.034之间;ThST3基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9937,PCR扩增效率在0.93580.9486之间。因此,构建的标准分子pMDSPS和pMDTheli既能作为普通PCR的阳性对照,也能用于定量标准曲线的构建,为转基因水稻的定量检测提供简便、价格低廉的标准分子打下基础。

  • 单位
    农业部; 深圳市农业科技促进中心

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