LC-MS/MS法同时测定人尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度

作者：谢利军; 杨雨晴; 沈叶; 应玉雯; 黄烽如; 张烨; 刘云; 孙鲁宁^*; 王永庆^*

来源：医药导报, 2020, 39(04): 549-554.

DOI：10.3870/j.issn.1004-0781.2020.04.022

• 氢化可的松
• 6β-羟基氢化可的松
• 尿液
• LC-MS/MS

目的建立同时测定人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的LC-MS/MS方法。方法分别以d4-氢化可的松和d4-6β-羟基氢化可的松为内标,尿液样本加入含内标的甲醇处理后分析。色谱柱为Waters CORTECS? C18+柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min-1。质谱条件采用电喷雾正离子源,扫描方式为多重反应监测,用于定量分析的检测离子分别为m/z 363.2→121.1(氢化可的松)、m/z 367.2→121.1(d4-氢化可的松)、m/z 379.2→325.2(6β-羟基氢化可的松)、m/z 383.2→328.2(d4-6β-羟基氢化可的松)。结果氢化可的松及6β-羟基氢化可的松在1.00～300 ng·mL-1和5.00～1500 ng·mL-1内线性良好,定量下限分别为1.00 ng·mL-1和5.00 ng·mL-1,批内和批间精密度均<15%,准确度在-6.9%～5.7%范围内,基质效应为95.6%～106.0%,提取回收率为97.2%～108.3%。尿液样本室温放置10 h、反复冻融3次及-80℃冰冻4个月稳定性良好,待测溶液进样器放置24 h稳定。结论该研究建立的分析方法灵敏、准确,样本前处理简便、快捷,可用于人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的测定,为人体CYP3A4活性的评价提供可靠的检测方法。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院