脑钠肽联合miR-328基因对缺血再灌注损伤模型大鼠心肌损伤的影响

作者：梁雁翎; 魏勇; 王兆东; 马骏; 迟增鑫; 郝诗苑

来源：微循环学杂志, 2019, 29(02): 8-13.

• 心肌损伤
• 脑钠肽
• miR-328基因
• 心肌细胞凋亡

目的:探讨脑钠肽(BNP)联合miR-328基因对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌损伤的影响。方法:按照随机数字表将50只大鼠分为5组,假手术组(Sham组,开胸后只穿线,不结扎)、MIRI模型组(I/R组,建立MIRI模型)、BNP组(建立MIRI模型前静脉给予BNP 0.01μg/kg)、miR-328组(建立MIRI模型前静脉给予miR-328 antagomir 200μl)和BNP+miR-328组(建立MIRI模型前静脉给予BNP和miR-328 antagomir,量同前),每组各10只。于再灌注结束后,获取心脏穿刺血液及心脏组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Sham组、I/R组和miR-328组心肌组织miR-328 mRNA表达水平;TTC+伊文思蓝双染色法测定各组心肌梗死面积;ELISA法测定血清肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;硫代巴比妥酸(TBA)法及邻苯三酚法分别测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)法测定心肌细胞凋亡率;Western blotting检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和核因子活化B细胞κ轻链增强子p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:I/R组miR-328 mRNA表达显著高于Sham组和miR-328组(P<0.05)。I/R组心肌梗死面积、CK-MB水平、TNF-α和MDA含量、细胞凋亡率、Bax和NF-κB p65蛋白表达水平均显著高于Sham组,IL-10含量、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均显著低于Sham组(P<0.05),而BNP组和miR-328组肌梗死面积、CK-MB水平、TNF-α和MDA含量、细胞凋亡率、Bax和NF-κB p65蛋白表达均显著低于I/R组,高于BNP+miR-328组,IL-10含量、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均显著高于I/R组,低于BNP+miR-328组(P<0.05)。结论:BNP及miR-328 antagomir均可降低炎症反应、氧化损伤及心肌细胞凋亡率,从而对MIRI起保护作用,而联合使用效果更明显,机制可能与其下调NF-κB p65信号通路有关。