PDCoV和PEAV二重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者：黄海鑫; 宋心玥; 汪伟; 李笨; 王茂鹏; 肖朋朋; 郑敏; 金宁一^*; 孙文超^*; 鲁会军

来源：中国兽医科学, 2020, 50(02): 141-146.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0010

• 猪德尔塔冠状病毒
• 猪肠道α冠状病毒
• 二重RT-PCR

猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪肠道α冠状病毒(PEAV)是两种新发现的猪传染性冠状病毒,临床上均以腹泻症状为主,症状相似,临床上难以快速诊断。为建立一种快速、准确区分PDCoV和PEAV的二重RT-PCR方法,本研究根据PDCoV和PEAV N基因序列,分别设计2对特异性引物,以阳性质粒为模板,对二重RT-PCR反应条件进行优化,并进行特异性、敏感性试验。结果显示,所建立的方法能够扩增出PDCoV和PEAV的特异性片段,大小分别为690 bp和208 bp,且对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)无扩增条带;对PDCoV和PEAV的最低检测量分别为5.13×102copies/μL、4.73×101copies/μL。对60份临床腹泻样本病料进行检测,结果 PDCoV的检出率为21.6%,未检测出PEAV。本研究所建立的二重RT-PCR方法可用于临床流行病学监测,为快速诊断PDCoV和PEAV提供理论依据和技术支持。

• 单位
  广西壮族自治区动物疫病预防控制中心; 温州大学