摘要
目的 研究大麻二酚对子宫内膜癌Ishikawa细胞的活性、增殖、迁移生物学作用以及促凋亡的作用机制。方法 用0,5,10,20μmol·L-1的大麻二酚处理Ishikawa细胞24 h。用细胞计数法-8(CCK-8)、集落形成实验和Transwell实验分别测定细胞增殖和迁移情况;用Hoechst 33258染色及AnnexinⅤ-FITC/PI双重染色方法检测Ishilawa细胞凋亡情况;用DCFH-DA荧光染料对细胞活性氧进行检测;以蛋白质印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto C)抗体、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase 3)的蛋白表达情况。结果 CCK-8检测显示,5,10,20μmol·L-1大麻二酚组的细胞增殖率分别为(82.38±9.63)%,(47.38±5.32)%,(36.06±4.14)%,具有浓度依赖性。与对照组相比,5,10,20μmol·L-1大麻二酚组细胞克隆形成率分别为(78.22±8.87)%,(42.69±4.70)%,(31.18±3.69)%,表明大麻二酚对Ishikawa细胞具有显著的抑制Ishikawa细胞克隆的作用。5,10,20μmol·L-1大麻二酚组细胞的迁移率分别为(78.62±4.25)%,(47.29±5.22)%,(36.24±3.98)%,提示大麻二酚对Ishikawa细胞迁移具有抑制作用。5,10,20μmol·L-1大麻二酚组细胞凋亡率分别为(12.26±4.78)%,(19.94±5.95)%,(33.79±3.68)%,提示大麻二酚显著诱导了细胞凋亡。随着大麻二酚浓度的增加,大麻二酚显著促凋亡蛋白Bax的表达水平,抑制凋亡Bcl-2蛋白的水平,同时细胞色素C和cleaved caspase 3也有显著增加。结论 大麻二酚通过增加活性氧水平和线粒体凋亡途径抑制细胞活性和迁移并促进其凋亡。
-
单位中国人民解放军空军军医大学; 西京医院