新型异喹啉类化合物12-4-Y对活化肝星状细胞凋亡的影响及其机制研究

作者：王军; 李光明; 仝艳艳; 邓怡林; 吴劼; 范建高

来源：实用肝脏病杂志, 2015, 18(04): 344-347.

• 肝星状细胞
• 异喹啉类化合物
• 凋亡
• 凋亡小体

目的探讨新型异喹啉类化合物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑并(5,1-a)异喹啉]对大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法以不同浓度(5、10、20、40和80μg/ml)12-4-Y处理HSC-T6细胞,分别于孵育后12h、24h、36h和48h收集细胞,以MTT法检测细胞增殖,以Hoechst染色对凋亡定性,以流式细胞分析对凋亡定量,应用Western blot检测凋亡关键蛋白Caspase3表达变化。结果 12-4-Y处理12h可浓度依赖性(在5~80μg/ml范围内)抑制HSC-T6细胞增殖,细胞增殖率分别为(1.086±0.013)、(1.055±0.019)、(0.957±0.012)、(0.793±0.021)和(0.553±0.031),均显著高于对照组水平(1.215±0.014,P<0.05);12-4-Y(20μg/ml)处理可时间依赖性抑制HSC-T6细胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,细胞增殖率分别为(0.957±0.012)、(0.852±0.024)、(0.641±0.032)和(0.492±0.017),与对照组(1.318±0.007,P<0.01)差异具有显著性;12-4-Y(20μg/ml)处理24h时,Hoechst染色显示HSC-T6可见明显凋亡小体,流式细胞分析显示凋亡率为(29.23±1.20)%,显著高于对照组[(5.47±1.39)%,P<0.001];蛋白质印迹显示凋亡关键蛋白Caspase3的裂解产物表达亦显著增加。结论新型异喹啉类化合物12-4-Y可显著诱导活化HSC凋亡,其机制与激活凋亡关键蛋白Caspase3有关。

• 单位
  复旦大学; 上海交通大学医学院附属新华医院