微小RNA-19a-3p通过调控转录因子ETS样蛋白3对乳腺癌细胞阿霉素耐药的影响

作者：伏鹏; 李文环; 李海^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(09).

• 乳腺癌
• 微小RNA
• 转录因子ETS样蛋白3
• 耐药

目的探讨微小RNA(miR)-19a-3p在乳腺癌细胞阿霉素耐药中的作用及其机制。方法以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象, 根据转染物的不同, 将细胞分为对照组、miR-NC组(转染miR-19a-3p mimics阴性对照miR-NC)、miR-19a-3p mimics组(转染miR-19a-3p mimics)和miR-19a-3p mimics+si-转录因子ETS样蛋白3(ELK3)组[共转染miR-19a-3p mimics和ELK3小干扰RNA(siRNA)]。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-19a-3p的表达, RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中ELK3的mRNA和蛋白表达, Western blot法检测细胞中P-糖蛋白(P-gp, ABCB1)的表达, 分别用不同浓度的阿霉素(0、5、10、25、50 nmol/L)处理各组细胞, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力, 评价各组细胞对阿霉素的药物敏感性。多组间均数比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t法。结果 miR-19a-3p mimics组miR-19a-3p表达(2.33±0.12比0.95±0.06, t=18.20, P<0.01)明显高于miR-NC组, ELK3 mRNA表达(0.62±0.05比0.99±0.10, t=6.01, P<0.01)、ELK3蛋白表达(0.32±0.02比0.56±0.02, t=18.76, P<0.01)、ABCB1蛋白表达(0.33±0.02比0.48±0.02, t=9.23, P<0.01)、半数抑制浓度(IC50)值[(3.74±0.44) nmol/L比(9.01±0.40) nmol/L, t=15.34, P<0.01]明显低于miR-NC组, 差异均有统计学意义。miR-19a-3p mimics+si-ELK3组miR-19a-3p表达(3.48±0.38比2.33±0.12, t=5.03, P<0.01)高于miR-19a-3p mimics组, ELK3 mRNA表达(0.32±0.02比0.62±0.05, t=10.69, P<0.01)、ELK3蛋白表达(0.15±0.02比0.32±0.02, t=10.05, P<0.01)、ABCB1蛋白表达(0.24±0.03比0.33±0.02, t=4.61, P<0.01)、IC50值[(1.67±0.24) nmol/L比(3.74±0.44) nmol/L, t=7.16, P<0.01]低于miR-19a-3p mimics组, 差异均有统计学意义。结论 miR-19a-3p能够抑制乳腺癌细胞阿霉素耐药, 其机制可能与miR-19a-3p抑制ELK3的表达有关。

• 单位
  武汉市中心医院; 华中科技大学同济医学院