土木香内酯对胶质瘤干细胞替莫唑胺耐药性的影响

作者：矫永庆; 吴文霄; 陈松; 郭天林; 王迅^*

来源：广西医科大学学报, 2020, 37(11): 1942-1947.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.11.002

• 土木香内酯
• 替莫唑胺耐药
• 腺苷酸活化蛋白激酶
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
• 胶质瘤干细胞

目的:探讨土木香内酯(ALT)对胶质瘤干细胞替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响,并初步研究其作用机理。方法:体外培养人胶质瘤细胞(U251),诱导分化为人胶质瘤干细胞(U251-SC),随机分为对照组、ALT低剂量组、ALT中剂量组和ALT高剂量组;进一步采用腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂处理U251-SC细胞,分为对照组、30μmol/L ALT组和30μmol/L ALT+AMPK抑制剂组。免疫荧光法检测U251-SC和U251的肿瘤干细胞标记物CD133和巢蛋白(Nestin)表达情况;CCK-8法检测各组U251-SC细胞存活情况;Western blotting检测各组U251-SC细胞AMPK、p-AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-mTOR表达情况。结果:U251细胞呈均匀分散生长状态,CD133和Nestin呈阴性;与U251细胞相比,U251-SC细胞呈"球体"生长状态,且表现为CD133和Nestin强阳性。与对照组相比,ALT低、中和高剂量组U251-SC细胞存活率、p-mTOR蛋白表达依次降低(P<0.05),凋亡率和p-AMPK蛋白表达依次升高(P<0.05)。与对照组相比,30μmol/L ALT组U251-SC细胞pAMPK蛋白表达和凋亡率显著升高(P<0.05),p-mTOR蛋白表达和存活率显著降低(P<0.05);与30μmol/L ALT组相比,30μmol/L ALT+AMPK抑制剂组U251-SC细胞p-AMPK蛋白表达和凋亡率显著降低(P<0.05),p-mTOR蛋白表达和存活率显著升高(P<0.05)。结论:ALT可能通过激活AMPK/mTOR通路诱导胶质瘤干细胞凋亡,增加胶质瘤干细胞TMZ敏感性。

• 单位
  大连市第三人民医院