高丹草SRAP-PCR反应体系优化及验证

作者：石悦; 刘拴成; 房永雨^*; 丁海君; 吕二锁; 路玉红

来源：北方农业学报, 2022, 50(01): 93-100.

• 高丹草
• SRAP-PCR
• 正交试验设计
• 体系优化
• 验证

【目的】筛选高丹草SRAP-PCR反应的最佳体系。【方法】采用单因素和正交试验设计相结合的方法，对影响高丹草SRAP-PCR反应体系的5个因素(d NTP、DNA、引物、Taq DNA聚合酶、Mg2+)进行优化；并对高丹草SRAP-PCR优化体系进行验证。【结果】高丹草SRAP-PCR的最佳反应体系为：d NTP浓度275μmol/L、模板DNA浓度3.0 ng/μL、引物浓度1.1μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.00 U、Mg2+浓度2.25 mmol/L，用dd H2O补足至20μL。【结论】筛选出的SRAP-PCR最佳体系扩增条带数目多、多态性丰富、重复性好。

• 单位
  内蒙古自治区农牧业科学院; 集宁师范学院