科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为解决化学合成法生产间苯三酚环境污染严重的问题,本研究设计2对不同的扩增间苯三酚合成关键基因phlD的引物,对前期分离得到的270余株假单胞菌进行筛选。采用LC-MS法对筛选出的目标菌株进行发酵产物检测,并对菌株进行种属鉴定及系统发育树构建;采用HPLC法测定其间苯三酚的产量,再利用正交试验优化菌株的发酵培养条件。结果显示,引物2在筛选产间苯三酚菌株方面效果较好,经LC-MS检测验证,筛选得到的海洋生境假单胞菌LBF-96发酵产物为间苯三酚,其经生理生化鉴定及16S核糖体RNA(16S rRNA)基因序列分析,确定为芸薹假单胞菌(Pseudomonas brassicacearum)。该菌株在28 ℃、150 r/min条件下发酵培养至72 h时,间苯三酚的产量为0.23 g/L,经正交试验优化发酵培养条件后,菌株在30 ℃、pH 7.0、200 r/min条件下间苯三酚的产量最高,比优化前提高了39%。这是关于芸薹假单胞菌产间苯三酚的首次报道,为间苯三酚的生物合成提供了新的种质资源。
-
单位中国海洋大学; 威海海洋职业学院; 自然资源部第一海洋研究所
