miR-27a-3p靶向表皮生长因子受体减轻脑出血引起的脑损伤

作者：王晓辉; 刘小玲; 胡军; 王乐; 蒋锋^*

来源：山西医科大学学报, 2022, 53(12): 1568-1575.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2022.12.012

• 表皮生长因子受体
• 血脑屏障
• 脑出血
• miR-27a-3p

目的 探究miR-27a-3p减轻大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)引起的脑损伤的分子机制。方法 将36只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、miR-27a-3p干预组(miR-27a-3p组)和miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR干预组(pcEGFR组),每组12只；另取12只健康SD大鼠作为假手术组。通过自体尾动脉血注入法构建ICH大鼠模型，假手术组健康SD大鼠只进针不注血，miR-27a-3p组ICH大鼠转染miR-27a-3p, pcEGFR组ICH大鼠转染miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR。采用定量实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织或血清中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的mRNA和miR-27a-3p的相对表达情况；采用Western blotting分析Occludin、Claudin-5和EGFR蛋白表达水平。采用免疫荧光染色对过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)阳性细胞进行定量分析；使用TUNEL染色分析血肿周围区域的细胞凋亡情况；通过免疫组织化学方法分析大鼠脑组织OX-42的蛋白表达情况。结果 与假手术组比较，模型组大鼠血清中miR-27a-3p水平降低(P<0.001);血肿周围组织中miR-27a-3p水平降低(P<0.01)。与模型组比较，miR-27a-3p组大鼠的Occludin和Claudin-5蛋白表达水平升高(P<0.05)。与假手术组比较，模型组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均升高(P<0.01);与模型组比较，miR-27a-3p组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均降低(P<0.05)。qRT-PCR和脑含水量检测结果显示，与模型组比较，miR-27a-3p组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均降低(P<0.05);与miR-27a-3p组比较，pcEGFR组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均升高(P<0.05)。结论 miR-27a-3p可显著减轻ICH诱导的脑水肿、白细胞浸润和神经元凋亡。外源性miR-27a-3p可能通过靶向紧密连接复合物和EGFR蛋白维持血脑屏障正常生理功能。

• 单位
  陕西省人民医院