新型冠状病毒在Vero-E6细胞中的增殖特征分析

作者：张炎华; 何文祥; 朱颖; 陈炜; 吴冰珊; 修文琼; 陈宏彬; 俞婷婷; 鄢育青; 吴晶晶; 袁平; 张小鸿; 骆婧; 翁育伟^*; 郑奎城^*

来源：中国人兽共患病学报, 2021, 37(01): 11-14.

• 新型冠状病毒
• 增殖特征
• Vero-E6细胞
• 体外

目的了解新型冠状病毒(2019-nCoV)在Vero-E6细胞中的增殖特征,为病毒的分离培养、抗病毒药物研究以及疫苗研制等工作提供基础。方法将2019-nCoV做半对数系列稀释,测定病毒的半数组织培养感染剂量(TCID50);以1.74×10-4TCID50/cell的病毒量感染Vero-E6细胞,在病毒吸附后第0～6 d分别收集病毒培养上清,测定上清中病毒感染滴度和病毒核酸拷贝数;测定病毒储存液冻融/非冻融、不同细胞悬液浓度、病毒吸附后洗涤/不洗涤等不同实验条件下的TCID50。结果 2019-nCoV感染Vero-E6细胞后,48 h内培养上清中的病毒TCID50和病毒核酸拷贝数到达或接近峰值,平均复制周期约为3.29 h;48 h后上清中病毒核酸拷贝数维持在较高水平但病毒感染滴度逐渐下降。病毒储存液的冻融、细胞浓度以及病毒吸附后洗涤等培养条件可轻微影响病毒TCID50。结论 2019-nCoV感染Vero-E6细胞在早期增殖迅速,感染后期病毒感染滴度逐渐下降,但病毒核酸拷贝数在上清中维持在较高水平。

• 单位
  福建省疾病预防控制中心; 公共卫生学院; 福建医科大学