miR-155-TP53INP1调节轴在结直肠癌化疗药物敏感性中的作用机制

作者：杨乐; 李传昌; 刘小双; 黄建平; 刘兆龙^*

来源：现代生物医学进展, 2022, 22(15): 2818-2874.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2022.15.004

• mi R-155
• TP53INP1
• 结直肠癌
• 耐药

目的：初步揭示mi R-155通过靶向调节TP53INP1表达水平影响结直肠癌细胞对5-FU化疗敏感性。方法：将人结肠直肠癌细胞系HCT116进行培养，提取细胞总RNA后，采用mi R-155逆转录特异性引物构建反转录体系进行PCR扩增，通过qRT-PCR检测mi R-155在5-FU耐药细胞HCT116/FU及敏感细胞株HCT116中的表达情况；取对数生长期细胞，分别转染mi R-155mimics、mi R-155抑制剂、mi R-155阴性对照后，采用CCK-8法检测mi R-155对细胞5-FU药物敏感性的影响，双荧光素酶报告基因系统验证mi R-155与TP53INP1的靶基因关系，Western blot检测mi R-155对TP53INP1表达的影响。结果：mi R-155在HCT116/Fu细胞中的表达量是HCT116细胞的7.25倍；在相同5-FU浓度时，HCT116+阴性对照的细胞生长抑制率均高于HCT116+mimics、半数抑制浓度显著低于HCT116+mimics，差异均具有统计学意义(P<0.05);TP53INP1是mi R-155的靶基因，能显著降低野生型TP53INP1 3’-UTR的荧光素酶活性；转染mi R-155 mimics后，TP53INP1的相对表达量显著下降，转染mi R-155抑制剂后，TP53INP1的相对表达量显著升高，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：mi R-155水平升高使HCT116细胞对5-FU的敏感性降低，mi R-155可能通过靶向调节TP53INP1的表达水平，从而影响结直肠癌细胞对5-FU的敏感性。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院