氟对斑马鱼骨骼发育的影响及与OPG/RANKL通路的相关性研究

作者：龚艺; 舒莉萍; 陈芳萍; 郑丹; 官志忠; 楼迪栋^*

来源：中华地方病学杂志, 2022, 41(02): 93-99.

• 氟
• 斑马鱼
• 软骨内成骨
• 骨骼发育

目的探究氟暴露对斑马鱼幼鱼骨骼发育的影响, 并探索其可能的分子机制。方法选择受精后6 h(6 hpf)野生型斑马鱼胚胎, 采用氟化钠[NaF, 对照组(0 mg/L NaF)、低氟组(25 mg/L NaF)和高氟组(100 mg/L NaF)]暴露至9 d。使用氟离子选择电极法检测斑马鱼幼鱼的整体氟含量, 观察并统计斑马鱼幼鱼的死亡及发育情况, 采用茜素红染色和阿尔新蓝染色分别分析斑马鱼幼鱼的骨矿化和软骨形成情况, 实时荧光定量PCR法分析sry相关高迁移率组盒9(Sox9)的同源基因Sox9a、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达情况。结果与对照组[(0.12 ± 0.01)μg/140条]比较, 低氟组[(0.28 ± 0.03)μg/140条]和高氟组[(0.64 ± 0.10)μg/140条]斑马鱼幼鱼整体氟含量均较高, 差异均有统计学意义(P均< 0.05)。与对照组比较, 高氟组斑马鱼幼鱼体长较短、鱼鳔发育缺失率和脊柱弯曲率均较高(P均< 0.05);低氟组茜素红染色骨矿化面积、累计光密度(IOD)和矿化椎骨数均较高, 阿尔新蓝染色软骨形成面积较低(P均< 0.05);高氟组茜素红染色骨矿化面积、IOD和矿化椎骨数均较低, 阿尔新蓝染色软骨形成面积较高(P均< 0.05)。与对照组比较, 低氟组OPG mRNA表达水平和OPG/RANKL比值均较高(P均< 0.05);高氟组RANKL mRNA表达水平较高, OPG/RANKL比值较低(P均< 0.05)。结论斑马鱼胚胎至幼鱼时期给予短时间的氟暴露即可造成斑马鱼幼鱼骨骼发育异常, 该影响可能与软骨内成骨和OPG/RANKL通路相关。

• 单位
  中国医学科学院; 贵州医科大学