摘要
研究开发了一种以高效液相色谱法(HPLC)为基础的方法,用于检测唾液酸原样及乳制品中N-乙酰神经氨酸的含量。检测样品在经过前期处理后,采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱法中使用0.005 mol/L的硫酸溶液和0.005 mol/L的硫酸甲醇溶液作为流动相。通过单因素和正交实验优化实验条件,当柱温为40℃、流速为0.6 mL/min、流动相pH值为2.0、流动相比例为85∶15(V/V)时,N-乙酰神经氨酸的保留时间为5.69 min,分离效果及精密度较好,在0~3.0 mg/mL的浓度范围内有良好的线性关系(R2=0.998 9)。加标回收率在99.2%~103.4%之间,精密度检测(relative standard deviation,RSD)在0.47%~1.26%之间。方法操作简便,结果准确可靠,精密度良好,提高了检验人员的技术操作性,适用于唾液酸原样及乳制品中的N-乙酰神经氨酸含量分析。