类NADC34 PRRSV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：袁丽莉; 朱振邦; 刘盼娆; 陈南华; 李燕华; 范娟; 陈昌海; 李向东

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-9.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230109.003

• 类NADC34 PRRSV
• TaqMan探针
• 实时荧光定量PCR

类NADC34 PRRSV自2018年在我国首次报道以来，流行范围不断扩大，在局部地区已演变为优势毒株。目前尚无针对类NADC34 PRRSV特异性的普通PCR或real-time PCR诊断方法，常规的PRRSV分型与鉴别诊断方法可能导致此类毒株被误诊为类NADC30 PRRSV。因此，本研究根据类NADC30 PRRSV与类NADC34 PRRSV在Nsp2基因的序列差异，设计特异性引物和探针，建立了类NADC34 PRRSV TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示，本研究建立的方法特异性良好；不同稀释度的阳性标准质粒在2.8 ×101 copies/μL～2.8× 106 copies/μL之间具有良好的线性范围，标准曲线R2值为0.997；本方法灵敏度高，检测下限为2.8 ×101 copies/μL；重复性分析结果显示，批内和批间试验的变异系数CV值均小于2.5%，呈现出良好的重复性。综上，本研究成功建立了快速检测类NADC34 PRRSV的实时荧光定量PCR方法，为开展此类毒株在我国流行状况的调查提供了有力的检测工具。

• 单位
  扬州优邦生物药品有限公司; 江苏省动物疫病预防控制中心; 扬州大学