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摘要
目的:探讨TRPM7离子通道在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:Western blotting,RT-PCR和间接免疫荧光法检测口腔鳞癌细胞OC2中TRPM7的表达和细胞内定位。MTT法和Transwell试验分别检测抑制TRPM7通道(2-APB、siRNA TRPM7)对OC2细胞增殖和迁移的影响。Western blotting检测2-APB或siRNA TRPM7阻断PI3K/AKT通路对OC2细胞中TRPM7的表达影响。采用膜片钳技术初步探索干预TRPM7通道对OC2细胞阳离子通透的影响。结果:OC2细胞中TRPM7过表达,主要表达在细胞质中。阻断TRPM7通道后,OC2细胞增殖和迁移能力受抑制,且呈浓度依赖性和时间依赖性。阻断TRPM7通道后,抑制OC2细胞TRPM7可下调磷酸化AKT以及磷酸化ERK的表达,而对组成性AKT以及ERK的表达无明显影响。膜片钳技术显示在TRPM7过表达的OC2细胞中TRPM7样电流激活,2-APB阻断TRPM7通道后电流明显减弱,而采用TRPM7通道活化剂Bradykinin后,电流明显增强。结论:TRPM7在口腔鳞癌细胞OC2中过表达,可能通过影响PI3K/AKT和MAPK-ERK信号转导途径以及阳离子内流发挥对细胞增殖、迁移的调节作用。
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单位第四军医大学; 西京医院; 军事口腔医学国家重点实验室
