具有双向分化潜能的鼠胎肝干细胞的分离、培养及鉴定

作者：于黎明; 陈姝; 何松

来源：重庆医学, 2016, 45(12): 1666-1669.

• 胚胎肝干细胞
• 离心法,梯密度
• 细胞,培养的
• 细胞分化

目的优化体外分离、培养和筛选胎鼠肝脏干细胞(LSC)的方法,并鉴定其双向分化的潜能。方法通过密度梯度离心和细胞差异性贴壁法分离小鼠胎肝干细胞(FLSC),以细胞平板克隆技术和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定FLSC的增殖,通过添加二甲基亚砜(DMSO)和HGF等诱导干细胞分化。结果分离后的FLSC 24h内贴壁,卵圆形,排列紧密,12周内活化,CD133、CD49f、EPCAM的阳性率分别为(97.95±1.21)%、(92.71±3.49)%、和(50.73±3.45)%,表达甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19);诱导分化后糖原染色(PAS)法染色可见红色糖原颗粒,表达清蛋白(ALB)、肝细胞核因子4α(HNF-4α)。结论联合密度梯度离心和差异性贴壁法成功分离FLSC,分离后的FLSC干性强,增殖能力强,具有向肝细胞和胆管上皮细胞双向分化的能力。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院