电针“肠病方”对急性溃疡性结肠炎大鼠结肠自噬及AMPK/mTOR信号通路的影响

作者：武荣林; 徐慧超; 蒋子文; 王海军; 曹玉霞; 孔繁敏; 董爱爱; 李让钱; 冀来喜^*

来源：针刺研究, 2023, 48(08): 818-824.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20220863

• 溃疡性结肠炎
• 自噬
• 电针
• 肠病方
• 腺苷酸激活蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

目的：观察电针“肠病方”对溃疡性结肠炎（UC）大鼠自噬水平和腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白表达的影响，探讨其治疗UC的作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和电针组，每组8只。采用自由饮用5%葡聚糖硫酸钠溶液7 d复制UC大鼠模型。电针组予双侧“天枢”“上巨虚”和“中脘”电针治疗，每次20 min，每日1次，连续3 d；西药组予美沙拉嗪悬液（200 mg/kg）灌胃，每日1次，连续3 d。观察并记录各组大鼠一般情况，记录粪便形态并进行隐血试验以评估疾病活动指数（DAI）;HE染色法观察大鼠结肠形态及病理变化；ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-10的含量；荧光定量PCR法检测结肠组织自噬标志物微管相关蛋白3B(LC3B)、p62 mRNA的表达水平；Western blot法检测结肠组织中p62蛋白表达量及LC3BⅡ/LC3BⅠ、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR比值。结果：与空白组比较，模型组大鼠一般情况较差，结肠黏膜屏障破坏，炎性细胞浸润，腺体萎缩或消失，隐窝数量减少，DAI评分升高（P<0.01），血清IL-6、TNF-α含量升高（P<0.01）,IL-10含量降低（P<0.01），结肠组织中p62蛋白及mRNA表达水平、p-mTOR/mTOR比值均升高（P<0.01）,LC3B mRNA表达水平及LC3BⅡ/LC3BⅠ、p-AMPK/AMPK比值均降低（P<0.01,P<0.05）。与模型组比较，电针组和西药组大鼠一般情况好转，结肠黏膜屏障缺损好转，炎性细胞浸润减少，腺体排列相对整齐，隐窝数量增加，DAI评分降低（P<0.01），血清IL-6、TNF-α含量降低（P<0.05,P<0.01）,IL-10含量升高（P<0.01,P<0.05），结肠组织中p62蛋白及mRNA表达水平、p-mTOR/mTOR比值均降低（P<0.01）,LC3B mRNA表达水平及LC3BⅡ/LC3BⅠ、p-AMPK/AMPK比值均升高（P<0.01）。与西药组比较，电针组结肠组织中p62 mRNA表达水平及LC3BⅡ/LC3BⅠ、p-AMPK/AMPK比值均升高（P<0.01,P<0.05）,p-mTOR/mTOR比值降低（P<0.05）。结论：电针“肠病方”能改善急性UC大鼠症状，其作用机制可能与促进结肠细胞自噬、提高AMPK磷酸化水平、降低mTOR磷酸化水平相关。

• 单位
  成都中医药大学; 山西中医药大学; 山西省针灸研究所; 第二临床学院