摘要
目的 探讨不同处理时间及浓度下L-谷氨酸对HT22、SY5Y两种细胞活性和细胞形态的影响,为构建L-谷氨酸诱导细胞损伤模型提供参考。方法 以0、0.25、0.5、1、2、5、10、15、20、25 mmol/L的L-谷氨酸处理HT22、SY5Y两种细胞,24 h后采用MTT、CCK8法检测两种细胞活性,检测细胞培养液中乳酸脱氢酶漏出率来观察细胞死亡情况;选取10和5 mmol/L的L-谷氨酸处理SY5Y细胞和HT22细胞0、2、4、8、12、18、24、36、48 h,采用MTT、CCK8法观察不同时间下L-谷氨酸对两种细胞活性影响的差异,并用显微镜观察其对细胞形态的损伤。结果 L-谷氨酸浓度为1、2、5、10、15、20、25 mmol/L时的SY5Y、HT22细胞活性低于0 mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);使用10、5 mmol/L的L-谷氨酸分别处理SY5Y、HT22细胞,4、8、12、18、24、36、48 h两种细胞的活性低于0 h,差异有统计学意义(P<0.05)。2、10、15、20、25 mmol/L的L-谷氨酸处理SY5Y细胞24 h,乳酸脱氢酶漏出率高于0 mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);1、2、5、20、25 mmol/L的L-谷氨酸处理HT22细胞24 h的乳酸脱氢酶漏出率高于0 mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。采用10 mmol/L的L-谷氨酸处理SY5Y细胞24 h后,MTT法检测细胞活性为(82.80±9.71)%,细胞形态表现为轻度损伤;采用5 mmol/L的L-谷氨酸处理HT22细胞24 h后,MTT法检测细胞活性为(72.01±5.33)%,细胞形态表现为轻度损伤。结论 采用5 mmol/L的L-谷氨酸处理HT22细胞24 h为HT22细胞理想的造模条件,采用10 mmol/L的L-谷氨酸处理SY5Y细胞24 h为SY5Y细胞的理想造模条件,为应用L-谷氨酸损伤细胞模型研究神经系统疾病的发病机制提供了实验条件参考。
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单位中心实验室; 北京市老年病医疗研究中心; 首都医科大学宣武医院