摘要
为探究hoxb3a基因在斑马鱼(Danio rerio)心脏早期发育中的调控作用,利用基因沉默技术(Morpholino)对斑马鱼胚胎进行hoxb3a基因敲降,并结合显微镜观察分析、实时荧光定量PCR、原位杂交技术分析hoxb3a基因对斑马鱼心脏发育的影响。结果表明:hoxb3a基因敲降组(hoxb3a morphant)出现心包腔肿大、心脏环化角度异常和心房心室形态改变等现象;原位杂交试验确定了hoxb3a基因在不同时空的表达区域,其表达位置的变化与神经嵴细胞参与心脏发育的形成有关;在受精后3 d,与对照组相比,hoxb3a基因敲降组胚胎一些心脏关键基因的表达量发生变化,其中心脏祖细胞相关基因nkx2.5、gata4及房室形成关键基因nppa的表达量均具有显著升高的趋势,同时与神经嵴发育相关的fgf8a基因表达量也明显升高。研究表明,hoxb3a基因在斑马鱼胚胎的早期心脏发育中,通过调控nkx2.5、gata4、nppa与fgf8a等相关转录因子的表达,参与斑马鱼早期心脏发育的过程,本研究结果为早期心脏发育研究提供了新思路。
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