摘要

目的研究兔富血小板血浆(PRP)作为血清替代物诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化, 观察细胞形态及分化率。方法取6只兔动脉血制备PRP, 从兔髂骨取骨髓BMSCs, 分为PRP组、胎牛血清组、无血清组。分别采用10%PRP、10%胎牛血清、无血清, 配比DMEM-F12培养。将每组第2代细胞分为实验组和对照组, 实验组加入诱导因子地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C, 对照组仍使用原培养基。观察诱导前后各组细胞形态学及各诱导组成骨细胞分化效率差异。结果 PRP组和胎牛血清组细胞诱导前生长迅速, 呈长梭形, 诱导后细胞体积逐渐增大, 形态变成三角形、多角形、圆形。PRP及胎牛血清组平均诱导7 d, 细胞自发聚集成复层, 形成可由茜素红S染成红色的钙结节及类似骨质结构。无血清组平均诱导14 d, 仅3只兔出现上述成骨表现。诱导20 d终止实验, PRP和胎牛血清组成骨细胞分化效率比较, 差异无统计学意义(P>0.05), 但两组均优于无血清诱导组, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论自体PRP可作为血清替代物, 用于BMSCs细胞增殖和诱导成骨细胞分化培养。