自拟安神方对心肾不交证失眠大鼠皮质区和海马区5-HT和DA信号通路影响

作者：李雪; 徐雅; 杜**^*; 白俊杰; 王旭; 李靖

来源：辽宁中医药大学学报, 2023, 25(10): 20-221.

DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2023.10.005

• 自拟安神方
• 心肾不交证失眠
• 不同脑区
• 多巴胺
• 5-羟色胺

目的 探索自拟安神方（简称安神方）对大鼠不同脑区5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和多巴胺（dopamine,DA）信号通路的影响，揭示安神方抗大鼠心肾不交证失眠的机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，阳性对照组，安神方高、中、低剂量组，每组10只。除正常组外，其他各组采用多因素方法制备改良的心肾不交证失眠大鼠模型，灌胃治疗2周。HE染色观察大鼠脑组织形态结构。高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测大鼠皮质区和海马区DA和5-HT的含量。免疫蛋白印迹法检测5-HT信号通路上5-HT1A受体、5-HT2A受体、磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein,CREB）、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和DA信号通路上D1R1在皮质区和海马区的蛋白表达。结果 HE染色显示模型组皮质区神经元有少量的凋亡，海马结构区变化不明显；安神方组皮质区神经元凋亡有所减轻。HPLC-ECD结果显示，与正常组比较，模型组皮质区和海马区DA含量均升高（P<0.05）,5-HT含量均显著下降（P<0.05）；与模型组比较，安神方组皮质区和海马区DA含量显著降低（P<0.05），同时海马区5-HT含量有所提高（P<0.05）。免疫印迹结果显示，与正常组比较，模型组皮质区5-HT1A和CREB蛋白表达降低（P<0.05），海马区D1R1蛋白表达升高（P<0.05）；与模型组比较，安神方组皮质区5-HT1A和信号通路上关键蛋白CREB的蛋白表达上调（P<0.05），并且海马区D1R1的蛋白表达下调（P<0.05），其信号通路上CREB蛋白表达差异虽无统计学意义，但各给药组仍有上调趋势。结论 安神方抗心肾不交证失眠的机制可能与抑制皮质区神经元凋亡，并促进皮质区和海马区5-HT通路功能、抑制DA通路功能有关。

• 单位
  北京中医药大学; 西藏藏医药大学